Skip to content

Regiospecyficzna monooksygenaza z nową stereopreferencją jest głównym szlakiem do natleniania kwasu arachidonowego w izolowanych komórkach naskórka.

2 miesiące ago

239 words

Przeanalizowaliśmy mechanizmy enzymatyczne odpowiedzialne za natlenienie AA w homogennych zawiesinach komórkowych uzyskanych przez trypsynizację naskórka zdrowych osób. Inkubacja komórek z AA (0,3-150 mikromolitu) niezmiennie dała w wyniku dominującą generację związku zidentyfikowanego jako kwas 12-hydroksyeikosatetraenowy (12-HETE) za pomocą HPLC i zarówno jonizacji chemicznej jonów ujemnych, jak i spektrometrii mas z uderzeniem elektronów. Maksymalne ilości 12-HETE wynosiły 126 +/- 21 pmol / 10 (6) komórek (+/- SE), a krzywe stężenie-odpowiedź dały połowę maksymalnych poziomów dla 12-HETE, podobnie jak PGE2 przy 2 mikroM AA. Zidentyfikowano również dwa kwasy epokseicosatrienowe pochodzące z AA. Analiza stereochemiczna za pomocą chromatografii chiralnej wykazała, że 12-HETE komórki naskórka było mieszaniną izomerów 12S- i 12R-hydroksylowych w stosunku molowym od 2: do 8: wśród osobników. Frakcjonowanie subkomórkowe w 12 000 g peletki (zawierającej mitochondria) i 100 000 g supernatantu (cytosolu) i peletki (mikrosom) wykazało, że ponad 99% 12-HETE zostało wygenerowanych przez aktywność enzymatyczną rozprowadzoną równo w dwóch peletkach. Zarówno aktywność mitochondrialna, jak i mikrosomalna zostały zwiększone po dodaniu NADPH i były hamowane przez tlenek węgla, ale stosunek molowy 12S / 12R-HETE był trzykrotnie większy w mikrosomach niż w frakcjach mitochondrialnych. Wyniki pokazują, że ludzki naskórek zawiera aktywną monooksygenazę (y) związaną z błoną, która korzystnie wytwarza 12-HETE z AA, wykazuje stereopreferencję 12S hydroksylacji i sugeruje obecność odrębnych mitochondrialnych i mikrosomalnych układów enzymatycznych w komórkach epidermy.
[hasła pokrewne: rozklad jazdy mzk stargard, womp katowice, brodawki wirusowe ]

0 thoughts on “Regiospecyficzna monooksygenaza z nową stereopreferencją jest głównym szlakiem do natleniania kwasu arachidonowego w izolowanych komórkach naskórka.”